Исто така се нарекува RFLP Analysis, оваа техника ги користи предностите на полиморфизмите во генетските кодови на индивидуалните луѓе. Иако сите членови на видот во суштина имаат иста генетска шминка, овие мали разлики содржат варијации во фенотипот, како што се појавата или метаболизмот, помеѓу поединците.
RFLP: техника на анализа и апликации
Технологијата за RFLP анализа вклучува сечење одреден регион на ДНК со позната варијабилност, со рестрикциски ензими, потоа одвојување на ДНК фрагменти со електрофореза на агарозен гел и одредување на бројот на фрагменти и релативни големини.
Рестрикциониот ензим е ензим, протеинска молекула, која ја намалува ДНК во рестрикционите места. Во суштина, примерокот ДНК е растурен и проголтан од рестрикционите ензими. Резултирачките фрагменти се одделени според нивните должини и моделот на големини на фрагментите ќе се разликува за секој тестиран поединец.
Целиот процес на RFLP бара проучување на сондата, фрагментација на ДНК, електрофореза, блотирање, хибридизација, перење и авторадиографија. Откриениот RFLP е визуелизиран со користење на Х-зраци во авторадиографија, каде што ДНК фрагментите можат да се гледаат и анализираат откако ќе се одделат еден од друг со електрофореза.
Некои од апликациите за RFLP анализа вклучуваат:
- ДНК отпечатоци од прсти . Форензичарите можат да ја користат RFLP анализата за да ги идентификуваат осомничените врз основа на примероци од докази собрани на сцени за злосторства.
- Татковство. RFLP исто така се користи при определување на татковство или за следење на потеклото.
- Генетска разновидност. Техниката може да се користи при проучување на еволуцијата и миграцијата на дивиот свет, проучување на моделите на одгледување кај животните и при откривање и дијагностицирање на одредени болести.
Техниката за користење на RFLP откривање на варијации во геномите е витална алатка во мапирањето на геномот и анализата на генетските болести. Ако локацијата на одредена генска болест се бара во одреден хромозом, тогаш истражувачите ќе ја анализираат ДНК на членовите на семејството со болеста, а потоа бараат слични шеми на наследување кај RFLP алелите.
Откако генот за болеста е локализиран, спроведување на RFLP анализа на други членови на семејството може да открие носител на мутантните гени или да го сигнализира севкупниот ризик за заболување. Важно е да се напомене дека технологијата RFLP не е широко употребувана сега кога се користат понови робусни техники за анализа на ДНК во форензичката наука и неколку други полиња.
Негативен аспект на анализата
За жал, методот на RFLP анализа е досаден и бавен. Освен тоа што се бара голема количина примероци ДНК - примерокот обично треба да биде околу големината на една четвртина, што е релативно голем за примероците на ДНК - процесот, од означувањето на сондата до перење и автодијадиграфија, може да потрае до цел месец да се заврши.
Резултатите од Проектот за човечки геном прилично ја заменија потребата за RFLP. Проектот овозможи да се утврди целата секвенца на ДНК пронајдена во човечките клетки, човечкиот геном и за идентификување на сите гени во човечкиот геном.