Како да се суши бактериската култура (лиофилизација)

Лиофилизација или сушење со замрзнување е кратка лабораториска процедура

Сушење од ладење, исто така наречена лиофилизација или криодескцијација, е процес на отстранување на водата од производот откако е замрзнат (а потоа ставен под вакуум) што овозможува мраз да се менува од цврсто во пареа, без да помине низ течна фаза. Мразот (или други замрзнати растворувачи) се отстрануваат од производот преку процесот на сублимација и молекулите на врзаните води се отстрануваат преку процесот на десорпција.

Основи на лиофилизацијата

Еден од најдобрите начини за складирање на бактериска, габична, квасец или друга култура на микроорганизми за долги временски периоди е да се користи процесот на сушење со замрзнување. Оваа кратка лабораториска процедура може да се преземе со кој било комерцијално достапен замрзувач кој ќе ја зачува вашата културна колекција. Бидејќи лиофилизацијата е најсложена и скапа форма на сушење, процесот обично се ограничува на деликатни, топлински осетливи материјали со висока вредност. Супстанциите што не се оштетени со замрзнување обично може да се лиофилизираат, така што складирањето во фрижидери е непотребно.

Овој процес може да трае до три часа, и до 24 часа, не вклучувајќи го и времето за раст на културата.

Чекор по чекор процес на лиофилизација

1. Прво, растејте ја културата во текот на ноќта, или тревникот, на микроорганизмот на LB или друга соодветна чиста агарна плоча.

2. Потоа, подгответе стерилни амбалажи за стегање со автоклави пред време, со капките (гумените затегнувачи) кои се поставуваат лабаво на врвот. Ставете хартиени етикети отпечатени со идентификација на културата во цевките пред автоклавирањето. Алтернативно, користете цевки со капачиња дизајнирани за стерилитет .

1. Додадете 4 ml лиофилизациски пуфер на плочата. Доколку е потребно, клетките може да се суспендираат со користење на стерилна стаклена прачка.

2. Брзо пренесување на суспензијата на културата во стерилизирани ампули. Додајте приближно 1,5 ml по шишенце. Запечатете го со гумената капа.

3. Замрзнете ја суспензијата на културата во шишенцата со поставување на вијалата во -20 степени Целзиус замрзнувач.

1. Откако културите ќе бидат замрзнати, подгответе го сушењето за сушење со тоа што ќе го вклучите и ќе овозможите време за стабилизирање на соодветната температура и услови за вакуум. Направете го тоа според упатствата на производителот за конкретниот бренд на сушење замрзнување што го користите.

2. Внимателно и асептично поставете ги капачињата за шишиња лабаво на врвот на шишенцата, така што влагата може да избега за време на процесот на сушење со замрзнување и ставете ги шишенцата во комора за сушење со замрзнување. Нанесете го вакуумот во комората според инструкциите на производителот.

3. Овозможете време на културата целосно лиофилизирање (изсушајте). Ова може да потрае од неколку часа до преку ноќ, во зависност од обемот на секој примерок и колку примероци имате.

4. Отстранете ги мострите од комората за сушење во согласност со упатствата на производителот и веднаш запечатете ги шишенцата со гумените капачиња, потоа врвовите за стегање.

5. Да се ​​чува колекцијата на лиофилизирана култура на собна температура.

Производи што ќе ви треба

• Замрзнување-фен
• Хранливи материи или други соодветни агарски плочи (и инкубатор за одгледување на култура)
• Стаклена прачка
• Буфер за лиофилизација
• Вијали со криви врвови со гумени затегнувачи (и прегратка за нанесување на капачињата)
• Замрзнувач

<sub>Референца:

СП Научен. Основни принципи на сушење од смрзнување. http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/</sub>