Овие пуфери може да се користат за биолошки апликации при блиска неутрална pH вредност
Трите pKa вредности за фосфорна киселина (од Прирачникот за хемија и физика на КПР) се 2.16, 7.21 и 12.32. Мононатриев фосфатот и неговата коњугатна база, динатриум фосфат обично се користат за генерирање на бафери со pH вредности околу 7, за биолошки апликации, како што е прикажано овде.
Создавањето на овој тампон е малку потешко отколку правење на TAE и TBE-бафери. Меѓутоа, не е исклучително тешко. Едноставно просечно. Тоа би требало да потрае околу 10 минути за да го избришам овој тампон. Еве како.
1. Одлучете за својствата на баферот
Пред да направите тампон, најпрво треба да знаете каква молрина сакате да биде, кој волумен треба да се направи и која е саканата pH вредност. Најголем дел од баферите најдобро функционираат во концентрации помеѓу 0,1 М и 10 М. pH треба да биде во рамките на 1 pH единица на киселата / конјугираната база pKa. За едноставност, оваа мостра пресметка ќе биде за 1 литар пуфер.
2. Одредување на соодносот на киселина со база
Користете ја равенката Хендерсон-Хаселбалх (подолу) за да се утврди кој однос на киселината на база е потребен за да се направи тампон од саканата pH вредност. Користете ја вредноста на pKa која е најблиска до саканата pH вредност и соодносот ќе се однесува на парниот конјугиран пар на киселина кој одговара на тој pKa.
HH равенка: pH = pKa + log ([Base] / [Acid])
За тампон од pH 6,9, [База] / [Киселина] = 0,4898
Замена за [Киселина] и решавање за [База]
Посакуваната моларност на тампон е збир на [Киселина] + [База].
За 1 М тампон, [База] + [Киселина] = 1 и [База] = 1 - [Киселина]
Со заменување на ова во односот равенката, од чекор 2, добивате:
[Киселина] = 0,6712 молови / L
Реши за [киселина]
Со користење на равенката: [Base] = 1 - [Acid], можете да пресметате дека:
[База] = 0,3288 молови / L
3. Измешајте ја киселината и базата на конјугира
Откако ќе ја искористите равенката Хендерсон-Хаселбах за да пресметате кое сооднос на киселина со базата е потребно за вашиот тампон, подгответе го само под 1 литар раствор користејќи ги точните количини на мононатриум фосфат и динатриум фосфат.
4. Проверете ја pH вредноста
Користете pH сонда за да потврдите дека е постигната точната pH вредност за тампон. Прилагодете малку колку што е потребно, користејќи фосфорна киселина или натриум хидроксид (NaOH).
5. Исправување на јачината на звукот
Откако ќе се постигне посакуваната pH вредност, внесете ја волуменот на тампон до 1 литар. Потоа разредете го тампон како што сакате. Истиот тампон може да се разреди за да создаде тампони од 0,5 М, 0,1 М, 0,05 М или нешто помеѓу нив.
6. Совети за баферот
Запомнете дека pKa не може лесно да се измери со точна вредност. Малку различни вредности може да бидат достапни во литературата од различни извори.
7. Што ви треба
За да го направите тампон, ќе ви требаат три супстанции, додека останатите материјали се опрема. Супстанциите се мононатриум фосфат, динатриум фосфат и фосфорна киселина или натриум хидроксид за да се прилагоди рН.
Исто така ќе ви треба pH метар и сонда и соодветна лабораторија. Ова вклучува волуметриска колба, дипломирани цилиндри, чаши и мешавини.
И на крај, ќе ви треба мешачка плоча.