Овој буфер се користи за проучување на ДНК движењето
Овој тампон има ниска јонска сила и низок капацитет за зачувување. Најдобро е да се електрофореза на големи (> 20 kb) парчиња ДНК и ќе треба често да се заменат или да се рециркулираат подолго (> 4 часа) време на гел.
Имајќи го тоа на ум, можеби ќе сакате да разгледате неколку серии од тампон.
Со оглед на тоа што тампонката е лесно да се направи и чекорите може да се извршат брзо, правењето повеќе од една серија не треба да биде особено одземаат време или тешко да се извлече. Користејќи ги инструкциите подолу, треба да се потребни само 30 минути за да се направи TAE тампон. Еве како:
Подгответе акции на EDTA
Растворот EDTA (етилендиамин тетраацетична киселина) се подготвува пред време. EDTA нема да оди целосно во раствор додека pH не се прилагоди на околу 8.0. За раствор од 500-милилитри раствор од 0,5 M EDTA, измерете 93,05 грама EDATA динатриумова сол (FW = 372,2). Растворете во 400-милилитри деионизирана вода и прилагодете ја pH вредноста со натриум хидроксид (NaOH). Дополнете го растворот до конечниот волумен од 500 милилитри.
Бришење на акции решение на TAE
Направете концентриран (50x) раствор на ТАЕ со тежина од 242 грама Трис база (FW = 121.14) и растворање во околу 750 милилитри деионизирана вода.
Внимателно додадете 57,1 милилитар глацијална киселина и 100 милилитри 0,5 М EDTA (pH 8,0). После тоа, прилагодете го растворот до конечен волумен од 1 литар. Овој основен раствор може да се чува на собна температура. PH на овој пуфер не е прилагоден и треба да биде околу 8,5.
Подгответе работно решение на TAE
Работното решение на 1x TAE пуфер е направено со едноставно разредување на основниот раствор за 50x во деионизирана вода.
Конечните растворени концентрации се 40 mM. Трис-ацетат и 1 mM EDTA. Пуферот сега е подготвен за употреба во водењето на агарозен гел.
Што ви е потребно за баферот
Бидејќи изработката на TAE-баферот бара само брз и едноставен сет на инструкции, бројот на материјали потребни за него не е претерано. Вие само ќе треба EDTA динатриум сол, трис база и глацијална оцетна киселина.
Изведувањето на тампон, исто така, бара pH мерач и стандарди за калибрација, како што е соодветно. Ќе ви требаат и 600 милилитри и 1500 милилитри чаши или колби, како и дипломирани цилиндри. Конечно, ќе треба деионизирана вода, мешајте барови и помешајте ги плочите.
Завиткување
Каде планирате да го направите тампон - на училишна страница, на работно место, или на друга локација, како што е вашиот дом? Проверете го инвентарот пред да почнете да бидете сигурни дека ги имате сите горенаведени материјали за TAE-баферот.
Ако не сакате да плаќаат за материјали, се препорачува да се избере тампон надвор од вашиот дом. Можете лесно да нарачате материјали што ви се потребни онлајн или посетете специјална продавница за нив.